Cresciuto nell'Accademia per giovani comici creata da Gigi Proietti, Enrico Brignano partecipa come comico e barzellettiere alla prima edizione del programma La sai l'ultima?, in onda su Canale 5.
Nel 1988 e nel 2000 è Giacinto in Un medico in famiglia; la serie tv gli offre una maggiore visibilità e soprattutto un maggiore riconoscimento da parte del pubblico che lo segue anche in teatro con estremo interesse.
Dal 2000 vive di cabaret e teatro in tournée in Italia. Nel 2007 conduce un quiz su Rai Due, dal titolo Pyramid, con Debora Salvalaggio. Dallo stesso anno fa parte del cast dei comici di Zelig.

Teatro
2000 Io per voi un libro aperto; 2002 Mai dire mouse; 2004 Non sia mai viene qualcuno; 2005 Evviva; 2006 Brignano con la O, A briglia sciolta; 2008 A sproposito di noi; 2009 Le parole che non vi ho detto.

Cinema
1991 Le mele marce; 1992 Abrogio; 1994 Miracolo italiano; 1997 In barca a vela contromano; 1999 La bomba; 2000 Si fa presto a dire amore...; 2001 South Kensington; 2007 SMS Sotto mentite spoglie; 2008 Un'estate al mare; 2009 Un'estate ai caraibi; 2010 La vita è una cosa meravigliosa.

Televisione
1993 Per amore o per amicizia; 1996 Il maresciallo Rocca; 1997 Macao; 1998 Un medico in famiglia; 2003 Sant'Antonio da Padova, Il bambino di Betlemme; 2004 Raccontami una storia; 2007 Pyramid, Zelig, Finalmente Natale; 2008 VIP, Finalmente soli; 2009 Fratelli Detective; Brignano con la O.